MOHSEN AZAD

1- هدف:

كمك در تشخيص پروتئوس، مورگانلا و پروويدنسيا از ساير باكتري هاي گرم منفي

2- اساس آزمايش:

فنيل آلانين اسيد آمينه اي است كه ضمن دآمنيه شدن به فنيل پيروويك اسيد تبديل مي شود، اين اسيد با افزودن كلرورفريك 10% و ايجاد رنگ سبز مشخص مي شود.

3- مواد و ابزار لازم :

- لوله حاوي فنيل الانين آگار

- كلرورفريك 10 درصد

4- مراحل انجام كار:

- سطح محيط با كلني ايزوله تلقيح شده ، در لوله به صورت شل بسته شود.

- بعد از انكوباسيون محیط در c °35به مدت 24-18 ساعت يا تا هرزمان كه رشد واضحي مشاهده گردد ، (cc5/0 ) 5-4 قطره كلرورفريك 10% مستقيماً به سطح آگار اضافه مي كنيم. لوله را مي چرخانيم تا كلني ها در آن غوطه ور شوند.

5- تفسير:

ظهور بلافاصله رنگ سبز بعد از ريختن معرف، بيانگر مثبت بودن اين تست است. در عرض 10 دقيقه رنگ سبز، كم رنگ تر مي شود، که با افزودن مقادير اضافي معرف، دوباره رنگ سبز ايجاد مي شود.

بعضي گونه ها به قدري سريع فنيل آلانين را دآمينه مي كنند كه بعد از 4 ساعت انكوباسيون محيط كشت، نيز تست مثبت مي شود.

6- كنترل كيفي:

كنترل مثبت: پروتئوس ولگاريس ATCC 33420

كنترل منفي: ATCC 25922 Ecoli

- كنترل كيفي فوق بايد براي هر سري ساخت جديد محيط يا معرف انجام گيرد.