سل كانتر ( آنالایزر هماتولوژی )


آنالایزرهای هماتولوژی به روش امپدانس الكتریكی آنالایزرهای هماتولوژی یا سل كانترها ، دستگاه های تمام اتوماتیكی هستند كه برای اندازه گیری كمی پارامترهای خون در آزمایشگاه های پزشكی مورد استفاده قرار می گیرند . وظیفه اصلی این دستگاه ها تهیه گزارش سریع و دقیق به روشی ساده از پارامترهای اصلی خون است ، به نحوی كه نمونه های غیر طبیعی از نمونه های طبیعی تفكیك گردیده و جهت انجام بررسی های بیشتر آنها از روش های متداول دیگر كمك گرفته می شود . 

اجزای اصلی سل كانتر
سل كانترها معمولا از سه بخش اصلی هیدرولیك ، پنوماتیك و الكترونیكی تشكیل می گردند .

وظایف سیستم هیدرولیك 
وظایف سیستم هیدرولیك شامل برداشت محصول های مورد نیاز دستگاه و نمونه خون یا Aspirating ، تخلیه
محلول ها یا خون برداشت شده یا Diapensing ، رقیق سازی نمونه یا Diluting، مخلوط كردن نمونه و محلول ها یا Mixing و افزایش محلول لیز كننده یا Lysing است . 

وظایف سیستم پنوماتیك وظیفه اصلی سیستم پنوماتیك تولید خلاء یا فشار ثابت جهت كنترل دریچه ها و همچنین كنترل حركت محلول ها و نمونه در داخل سیستم هیدولیك است .

وظایف سیستم الكترونیكی 
این سیستم توسط یك ریز پردازنده ( میكروپروسسور ) كنترل می شود و وظایف زیر را به عهده دارد :
1 ) اندازه گیری وپردازش سیگنال های حاصل از تغییر امپدانس 
2 ) محاسبه و انتقال نتایج به چاپگر یا هر خروجی دلخواه در سیستم 
3 ) ترسیم گراف پارامترهای اصلی 
4 ) كنترل زمان اندازه گیری و توالی تست ها 
5 ) اجرای برنامه Q.C و كالیبراسیون سیستم 
6 ) ذخیره و بازیابی ( Save and Load ) نتایج 

محلول ها و مواد مورد نیاز در دستگاه سل كانترالف ) محلول ایزوتون یا Diluent : برای رقیق كردن خون از یك محلول ایزوتونیك كه می تواند محیطی شبیه پلاسمای خون را تأمین نماید ، استفاده می شود . بدین ترتیب كه یك رسانای مناسب جهت شمارش سلول های خونی ایجاد می گردد . 
ب ) محلول لیز كننده یا Lyse از این محلول برای از بین بردن غشای سلول های قرمز در كاپیلاری مخصوص شمارش WBC استفاده می شود ، بدین ترتیب تداخل اندازه بین سلول های قرمز و سفید در شمارش آنها از بین می رود . همچنین از جذب نوری مخلوطی كه از لایزوهموگلوبین تشكیل گردیده است ، برای اندازه گیری غلظت هموگلوبین استفاده می شود . 
ج ) محلول شستشو یا Rinse : محلول شستشو نوعی دترجنت است كه برای شستشوی تیوب ها و كاپیلاری ها و مرطوب نگه داشتن آنها پس از هر سیكل اندازه گیری مورد استفاده قرار می گیرد . 
د ) محلول شستشوی آنزیماتیك یا E – Z Cleanser : یك محلول آنزیمی مخصوص است كه برای پاك كردن بهتر تیوب ها وكاپیلاری به صورت روزانه مورد استفاده قرار می گیرد ( قبل از خاموش كردن دستگاه ) و ضرری برای قسمت های پلاستیكی دستگاه ندارد .
ه ) محلول پاك كننده پروب ها یا Probe Cleanser : از این محلول برای پاك كردن و حل كردن لخته خون های به جای مانده در پروب ها و تیوب ها و كاپیلاری دستگاه استفاده می شود و معمولا این محلول باید 15 دقیقه در این مسیرها قرار گیرد تا مؤثر واقع شود . 
و ) كالیبراتور : یك محصول خنوی با پارامترها و مقادیر مشخص و ثابت است كه به صورت تجارتی و مطابق با استانداردهای مرجع پزشكی تولید می شود و از آن برای كالیبره كردن دستگاه سل كانتر استفاده می شود . 
ز ) كنترل : یك محصول خونی با پارامترها و مقادیر مشخص وثابت است كه به صورت تجارتی در سه نوع Low ، Normal و High تولید می شود . خون كنترل باید روزانه برای چك كردن عملكرد دستگاه سل كانتر مورد استفاده قرار گیرد .

اصول شمارش سلول های خونی
نمونه رقیق شده مورد اندازه گیری توسط یك فشار منفی به داخل روزنه WBC و RBC مكش می شود . در سیستم اندازه گیری ، یك لوله شیشه ای دقیق كه لوله اندازه گیری نامیده می شود ، وجود دارد كه وظیفه آن كنترل ثابت بودن حجم نمونه مورد اندازه گیری در طول یك سیكل شمارش است . در بالا و پایین این لوله اندازه گیری دو سنسور نوری قرار داده شده كه فاصله بین این دو سنسور ، حجم نمونه مورد اندازه گیری را مشخص می نماید و از آنجایی كه این فاصله همیشه ثابت است ، حجم های اندازه گیری شده در دیسك های مختلف شمارش نیز ثابت است . 
سلول های سفید خون ( WBC ) ، سلول های قرمز خون ( RBC ) و پلاكت ها به روش امپدانس الكتریكی شمارش شده و سایز بندی می شوند . این روش بر اساس اندازه گیری تغییرات در مقاومت الكتریكی بین دو الكترود مثبت و منفی پایه گذاری شده است . شایان ذكر است كه تغییرات در مقاومت الكتریكی بین دو الكترود ، ناشی از عبور ذرات و سلول های خونی با اندازه های مختلف از روزنه بین الكترودهای مثبت و منفی است . الكترودها در زیر سطح محلول در دو طرف یك روزنه كه Aperture نامیده می شود ، قرار داده شده اند و تشكیل یك مسیر الكتریكی را می دهند . 
سلول های خونی دارای اندازه های مختلفی هستند . بر اساس این اندازه ها ، هر سلول كه از درون روزنه عبور نماید موجب افزایش امپدانس الكتریكی بین دو الكترود می شود . بدین ترتیب می توان امپدانس های ایجاد شده را به سلول های مشخص نسبت داد .
دستگاه سل كانتر سلول های خونی را به تنهایی شمارش و بر اساس اندازه دسته بندی می نماید . حجم مشخصی از نمونه رقیق شده آماده قرائت از روزنه 70 میكرومتری RBC و نیز از روزنه 100 میكرومتری WBC عبور نموده و شمارش انجام می گیرد . همچنین یك سیستم نوری برای قرائت هموگلوبین در دستگاه سل كانتر طراحی شده است . این سیستم دارای دو سنسور نوری است . وقتی محلول آماده شمارش از سنسور بالایی عبور می نماید ، سیكل شمارش آغاز می گردد و با عبور از مقابل سنسور پایینی این سیكل خاتمه می یابد ، لذا در كلیه سیكل های شمارش حجم ثابت و مشخصی از محلول آماده شمارش می شود . بنابراین اگر یك حباب و یا یك لخته خون در محلول آماده وجود داشته باشد ، سیستم سریعا اخطار می دهد و اپراتور متوجه خطا در شمارش می گردد .

سیستم نوری جهت اندازه گیری و ثبت حجم اندازه گیری

DILUTION
در خون كامل سلول ها بسیار نزدیك به یكدیگر هستند ، بنابراین برای جداسازی و روان سازی آن باید از یك محلول رقیق ساز ایزوتونیك استفاده كنیم . در سل كانترهایی كه به روش امپدانس الكتریكی كار می كنند ، به دو روش می توان سیكل اندازه گیری را آغاز نمود :روش اندازه گیری خون كامل و روش اندازه گیری خون رقیق شده. 

روش اندازه گیری خون كامل در این روش 13 میكرولیتر از خون كامل توسط دستگاه مكش می شود ، سپس با 5/3 میلی لیتر محلول ایزوتون رقیق می گردد ( 269 : 1 نسبت رقیق سازی اولیه ) . سپس این محلول رقیق شده اولیه به دو قسمت تقسیم 
می گردد : 
الف ) 6/15 میكرولیتر از محلول رقیق شده اولیه مكش می شود و با 6/2 میلی لیتر محلول ایزوتون مجددا رقیق می گردد ( رقیق سازی ثانویه 44833 : 1 ) . این محلول برای شمارش سلول های قرمز خون ( RBC) و پلاكت ها ( PLT ) مورد استفاده قرار می گیرد . 
ب ) بقیه محلول رقیق شده با نیم میلی لیتر محلول لایز تركیب می شود ( نسبت رقیق سازی ثانویه 308 : 1 ) . این محلول برای شمارش سلول های سفید ( WBC ) و اندازه گیری غلظت HGB مورد استفاده قرار می گیرد . 
روش اندازه گیری خون رقیق شده 
در این روش اپراتور ابتدا 20 میكرولیتر از خون كامل را با 6/1 میلی لیتر محلول ایزوتون رقیق می سازد ( نسبت 
رقیق سازی خارجی 80 : 1 ) ، سپس 7/0 میلی لیتر از محلول رقیق شده خارجی توسط دستگاه مكش می شود و مجددا با 5/2 میلی لیتر محلول ایزوتون رقیق می گردد ( نسبت رقیق سازی اولیه در داخل دستگاه 366 : 1 ) ، سپس این محلول رقیق شده اولیه به دو قسمت زیر تقسیم می گردد: 
الف ) 8/24 میكرولیتر از محلول رقیق شده اولیه مكش شده و مجددا با 3 میلی لیتر محلول ایزوتون رقیق 
می گردد ( نسبت رقیق سازی ثانویه 44274 : 1 ) . این محلول برای شمارش های RBC و PLT مورد استفاده قرار می گیرد . 
ب ) بقیه محلول رقیق شده اولیه با 36/0 میلی لیتر محلول لایز تركیب شده و برای شمارش WBC و اندازه گیری غلظت HGB مورد استفاده قرا می گیرد ( نسبت رقیق سازی ثانویه 366 : 1 ) . 

هنگامی كه سلول های خون از روزنه مخصوص شمارش عبور می نمایند ، به طور لحظه ای تغییراتی در امپدانس و الكترود مثبت و منفی دو طرف روزنه ایجاد می شود و چون این تغییر امپدانس ارتباط مستقیمی با اندازه سلول عبور كرده دارد ، می توان امپدانس های ایجاد شده را به نوع سلول ارتباط داد . 
در دستگاه سل كانتر ، امپدانس های تغییر یافته تقویت می شوند و مطابق شكل زیر دسته بندی می گردند .


موضوعات مرتبط: روش هاي كنترل كيفي آزمايشگاه باليني

تاريخ : سه شنبه ۱۳۹۱/۱۲/۲۲ | 11:6 AM | نویسنده : محسن آزاد |

هر بيماري اگر بموقع تشخيص داده شود، مقابله با آن آسان‌تر خواهد بود. اين مساله در مورد اغلب بيماري‌ها صادق است. حتي گاهي يك بيماري عفوني ساده اگر بموقع تشخيص و درمان نشود، مي‌تواند به از دست رفتن يك زندگي يا به دنيا آمدن نوزاد ناقص منجر شود و زندگي خانواده‌اي را بشدت تحت تاثير قرار دهد. حال سوال مهم اينجاست كه چرا با وجود پيشرفت‌هاي صورت گرفته در علوم آزمايشگاهي و امکان چكاپ‌هاي سالانه، تشخيص و پيگيري بسياري از بيماري‌ها در كشور ما پيش از آن‌كه به مرحله حاد خود برسد، فراهم نيست؟

دكتر عيسي صالحي، ايمونولوژيست و عضو هيات علمي دانشگاه علوم پزشكي تهران در گفت‌وگو با جام‌جم مي‌گويد: متاسفانه در كشور ما جنبه‌هاي مختلف سلامت جسم و روان در درجه چندم اولويت زندگي است. يعني بسياري از افراد به سالم بودن خودرويشان بيشتر از سلامت دهان و دندان يا قلب و عروق خود اهميت مي‌دهند.

به نظر مي‌رسد با فرهنگ سازي و گسترش بيمه‌هاي حمايتگر مي‌توان اين وضع را تغيير داد. چرا كه اگر از نظر اقتصادي هم به مسأله نگاه كنيم بايد گفت كه با چكاپ بموقع و تشخيص زودهنگام بسياري از بيماري‌ها مي‌توان از عوارض بهداشتي، رواني، اقتصادي و اجتماعي بروز بيماري‌هاي پيشرفته جلوگيري كرد.

آزمايش‌هاي مهم و حياتي

بسته به اين‌كه هدف از انجام آزمايش چه باشد اهميت آزمايش‌هاي مختلف، متفاوت است. گاهي ممكن است آزمايشي براي تشخيص يك بيماري ارزش بسيار ويژه‌اي داشته باشد، در حالي كه در موارد ديگري اصلا اهميت ندارد.

بنابراين تمام آزمايش‌هايي كه از سوي پزشك معالج درخواست مي‌شود براي تشخيص يا گاهي رد يك بيماري خاصي كه مورد نظر پزشك است مهم است.

دكتر صالحي با اشاره به فاصله زماني چكاپ‌هاي آزمايشگاهي در افراد مختلف مي‌گويد: فاصله زماني بين چكاپ بستگي زيادي به سن بيمار، جنس بيمار، شغل بيمار، وضع سلامت و شيوه زندگي و تغذيه فرد، سابقه ژنتيكي و خانوادگي و عوامل ديگري دارد، اما به طور كلي در افراد طبيعي كه مشكل خاصي ندارند، توصيه مي‌شود كه در بالاي پنجاه سالگي حداكثر هر يك سال و در افراد با سن پايين تر هر دو تا سه سال يك بار چكاپ انجام شود.

اين متخصص علوم آزمايشگاهي تاكيد مي‌كند: معمول‌ترين آزمايش‌ها شامل قند، اوره، اسيد اوريك، چربي‌هاي خون، آزمايش‌هاي كبدي، كليوي، تيروئيد و آزمايش بررسي التهاب در بدن و شمارش سلول‌هاي خوني است كه مي‌توان بيماري‌هاي ديابت، بيماري‌هاي كليوي، كبدي، نقرس و بيماري‌هاي تيروئيدي و بيماري‌هاي التهابي از جمله آرتريت روماتوئيد را با اين آزمايش‌ها و البته در كنار معاينات باليني كه توسط پزشك انجام مي‌گيرد، تشخيص داد.

آزمايشهاي قبلي را هميشه نگه داريد

همراه داشتن آزمايش‌هاي قبلي براي مقايسه نتايج آزمايشگاهي با نتايج قبلي بيماران ضروري است. گرچه نتايج بسياري از آزمايش‌هاي يك فرد در طول زمان و به دلايل مختلف از جمله مصرف داروها، فعاليت فيزيكي، تغذيه و... دچار تغييرات زيادي مي‌شود، اما اگر روال زندگي فرد تغيير چنداني نكند يا درمان خاصي صورت نگيرد، نتايج بسياري از آزمايش‌هاي تغيير خاصي نيز نشان نخواهد داد.

يعني مسئولان آزمايشگاه با در نظر گرفتن تمام اين موارد مي‌توانند با مقايسه نتايج آزمايش‌ها با نتايج قبلي بيماران جواب آزمايش را با دقت و صحت بيشتري گزارش كنند.

بنابر تاكيد متخصصان، نگهداري آزمايش‌هاي قبلي تا سال‌ها بخصوص در مورد تشخيص بيماري‌هاي عفوني خاصي كه عفونت مادام العمر ايجاد مي‌كند، بيشتر كاربرد دارد.

آزمايش‌هاي ضروري هميشگي

به گفته دكتر صالحي‌ اگر فرد، بيماري خاصي نداشته نباشد يك چكاپ معمولي شامل بررسي قند، اوره، اسيد اوريك، چربي‌هاي خون، آزمايش‌هاي كبدي، كليوي، تيروئيد و آزمايش بررسي التهاب در بدن و شمارش سلول‌هاي خوني سالانه يا هر دو سال يك بار برايش كافي است.

وي تاكيد مي‌كند: البته در صورتي كه فرد سابقه ابتلا به بيماري‌هاي خاصي را داشته باشد يا سابقه خانوادگي مرتبط با بيماري خاصي را داشته باشد، آزمايش ويژه آن بيماري نيز به آزمايش ديگر اضافه خواهد شد. درآقايان در سنين سالمندي بررسي اختلالات پروستات را هم مي‌توان به اين آزمايش‌ها اضافه كرد.

تاثير دارو‌ها بر نتيجه آزمايش

بنابر تاكيد متخصصان علوم آزمايشگاهي تاثير داروها بر نتيجه آزمايش بسته به نوع داروي مورد استفاده و نوع آزمايش درخواستي متفاوت است. بعضي از داروها بر بعضي آزمايش‌ها اثر بسيار زيادي دارد مثلا مصرف وارفارين يا آسپرين يا تركيبات مشابه تاثير شديدي در نتايج آزمايش‌هاي انعقادي دارد، ولي بر ميزان قند و اوره خون تاثيري ندارد.

بنابر اين هنگام مراجعه به آزمايشگاه بهتر است نوع و مقدار داروي مصرفي را به آزمايشگاه اطلاع دهيم تا آزمايشگاه با اطمينان بيشتري بتواند نتايج صحيح را گزارش كند. همچنين پرسيدن سوابق يك بيماري در شخص مورد آزمايش به مسوولان آزمايشگاه كمك مي‌كند روش و استانداردهاي مناسب با شرايط بيمار را در انجام آزمايش‌ها اعمال كند.

مهم‌ترين آزمايش‌ها براي سرطان‌هاي شايع در زنان و مردان

بنابر تاكيد متخصصان، در خانم‌ها سرطان‌هاي پستان و دهانه رحم شايع‌تر است كه براي تشخيص زودهنگام آنها علاوه بر معاينه پزشك متخصص آزمايش‌هاي متعددي وجود دارد كه توسط پزشك معالج درخواست مي‌شود.

آزمايش تشخيص تومورهاي سرطان پستان، بررسي نمونه‌هاي پاپ اسمير (آزمايش تشخيص سرطان دهانه رحم) و انجام بررسي‌هاي حضور HPV (آزمايش تعيين نوع ويروس زگيل تناسلي از نظر ميزان خطرناك يا بي‌خطر بودن) در دستگاه ادراري تناسلي از اين دسته آزمايش‌ها در خانم‌هاست.

در مورد آقايان سرطان پروستات در سنين سالمندي شايع است و انجام آزمايش‌هاي تشخيص سرطان پروستات از قبيل PSA به طور سالانه توصيه مي‌شود.

بررسي ميزان آنزيم‌هاي كبدي

آنزيم‌هاي كبدي پس از تخريب سلول‌هاي كبدي در خون آزاد مي‌شود و افزايش مقدار خوني اين آنزيم‌ها مي‌تواند بيانگر اختلالات كبدي باشد.

دكتر صالحي با اشاره به اين مطلب مي‌افزايد: اختلالات كبدي طيف وسيعي از بيماري‌ها از بيماري‌هاي عفوني گرفته تا بيماري‌هاي ناشي از مصرف الكل يا بيماري‌هاي خودايمن را شامل مي‌شود. از سوي ديگر بايد در نظر داشت آنزيم‌هايي كه به اصطلاح كبدي ناميده مي‌شود، اختصاصي كبد نبوده و در بيماري‌هاي ديگري نظير بيماري‌هاي پانكراس، دستگاه گوارش و حتي بيماري‌هاي استخواني مقادير آنها افزايش مي‌يابد. پس تفسير نتايج آزمايشگاهي مرتبط توسط پزشك متخصص و با در نظر گرفتن علائم و شرايط باليني صورت مي‌گيرد.

علائم باليني پيش از آزمايش تشخيص سرطان

بنابر توصيه متخصصان، خون‌ريزي‌هاي مشاهده شده در ادرار و مدفوع را بخصوص در سنين سالمندي بايد جدي گرفت. چراكه اگر سرطان در دستگاه گوارش يا ادراري رخ دهد، مي‌تواند موجب بروز خون‌ريزي در اين دستگاه‌ها شود.

گرچه هر خون‌ريزي ناشي از سرطان نيست، اما از آنجا كه سرطان ممكن است هر بافت يا اندامي را درگير كند و عوارض و علائم مختلفي را موجب شود، پس توصيه مي‌شود هر گونه عملكرد غيرطبيعي قسمت‌هاي مختلف بدن خود را جدي بگيريم و قبل از اين‌كه بيماري‌ها از جمله سرطان به مرحله غيرقابل درمان يا مراحل مشكل‌تر برسد با مراجعه به پزشك متخصص و آزمايش‌هاي دوره‌اي از وضع سلامت خودآگاهي پيدا كنيم.


موضوعات مرتبط: روش هاي كنترل كيفي آزمايشگاه باليني

تاريخ : پنجشنبه ۱۳۹۱/۱۱/۱۲ | 1:22 PM | نویسنده : محسن آزاد |

● مقدمه

اصطلاح اتوماسیون Automation  در بیوشیمی بالینی به فرآیندی گفته می شود که در آن یک دستگاه تعداد زیادی از تستها را با دخالت اندک تکنسین یا کارشناس انجام می دهد.
انجمن بین المللیشیمی محض و کاربردی IUPAC  اتوماسیون را بصورت، جایگزینی تلاشها و فعالیتهای انسان در انجام یک فرآیند با وسایل و ابزار الکترومکانیکی که دارای خصوصیات خود تنظیمی باشند ، تعریف میکند.
اتوماسیون از سال 1950 با افزایش تقاضای تستهای متنوع آزمایشگاهی شروع شد و آزمایشگاهها را قادر به انجام حجم کاری Work Load  زیادتر و متنوع تر در زمان کوتاهتر و بدون نیاز به افزایش پرسنل ساخت .
امروزه سازمان دارویی و غذایی امریکا (FDA ) اتوماسیون را استفاده از سیستمهای مکانیکی کنترل شونده به وسیله کامپیوتر، تعریف می نماید.
آنالایزرهای بیوشیمیایی: دستگاههایی هستند که غلظت متابولیتها ، الکترولیتها ، پروتئینها و داروها را در سرم ، پلاسما ، ادرار و مایع مغزی ـ نخاعی (CSF ) و سایر مایعات بدن با دقت وصحت زیاد اندازه گیری میکنند.
مزایای بکارگیری اتوآنالایزرهای بیوشیمی در آزمایشگاه:
1ـ افزایش سرعت و حجم کاری Work Load
2ـ کاهش و حذف خطاهای انسانی
3ـافزایش دقت و صحت نتایج
4ـ صرفه جوئی در مصرف نمونه Sample و مواد Reagents
5ـ دقت در تکرار آزمایش (تکرار پذیر بودن آزمایش)
6ـ کاهش هزینه­های جانبی و کاهش پرسنل در آزمایشگاه
نکتهٔ مهم : افزایش تکرار پذیری توسط دستگاههای اتوآنالایزر به معنی افزایش صحت نمی­باشد چون صحت نتایج در گرو روش آنالیتیک به کار رفته ومحدودیتهای آن می­باشد و در واقع دستگاههای آنالایزر اتوماتیک ، اشکالات ذاتی و کمبودهای متد آزمایش را جبران نمی­کنند.
امروزه استفاده از دستگاههای اتوماتیک و متدهای مربوطه برای رسیدن به کیفیت مورد نظر در سطح بالا ضروری بوده و برای تبدیل یک آزمایشگاه کوچک به آزمایشگاه بزرگ ومدرن با کیفیت مطلوب اتوماسیون امری اجتناب ناپذیر می باشد. اگرچه قیمت دستگاههای اتوماتیک در ابتدا بالا به نظر میرسد ولی با کاهش تعداد پرسنل و کاهش مصرف Reagents  و بهبود کیفیت نتایج وسرعت پاسخ­دهی کوتاه تر ، جبران می گردد.
● انواع اتوآنالایزرهای بیوشیمی:
انواع اتوآنالایزرهای بیوشیمی از لحاظ قابلیت برنامه ریزی (Programming) :
به دودستهٔ عمده 1ـ باز Open  و 2ـ بستهClosed  تقسیم می شوند.
درسیستمهای Open اپراتور قادر است پارامترهای هر تست را تغییر داده و از کیتهای متنوع جهت دستگاه استفاده نماید.
در حالی که در سیستمهای Closed پارامتر تستها توسط سازنده ستگاه برنامه ریزی شده و قابل تغییر نمی­باشند و لذا فقط باید از کیتهای کمپانی سازنده برای دستگاه استفاده شود.
انواع اتوآنالایزرهای بیوشیمی از لحاظ نوع خوانش (Reading Method) :
1ـ سیستمها Batch : خوانش تست ها در محلی به نام فلوسل و بصورت تست به تست انجام میشود.
2- سیستمهای Random Access : خوانش تست ها از طریق همان کووت واکنش و عمدتا بصورت نمونه به نمونه انجام میشود.
3ـ سیستمهای Time Optimized Multi Batch : خوانش تست ها در محلی به نام فلوسل بصورت تست به تست و یا بیمار به بیمار انجام میشود.

    کنترل کیفی در آنالایزرهای بیوشیمی● 

1.  کنترل کیفی سرعت مکش (Aspiration) و
کنترل سرعت تخلیه (Dispense) :
اکثر اتوآنالایزرها از یک پمپ برای برداشت نمونه­ها ، کنترلها ، استانداردها و Reagents استفاده می­کنند. و به خاطر متفاوت بودن ویسکوزیته این مواد ممکن است درمقدار مورد نظر خطا ایجاد شود که در اتوآنالایزرهای نسل جدید توسط نرم افزاری به نام Auto Diagnostic Software این خطا تصحیح شده است. از طرف دیگر سرنگ سمپلر با داشتن یک قسمت تفلونی در سر خود موجب روانی سرنگ و عدم جذب حباب هوا و غیره می شود.
نکتهٔ مهم: درستی نسبت مقدار نمونه به مقدار معرف در صحت نتایج و خطی بودن تست بسیار مهم بوده و ثابت بودن این نسبت موجب دقت بالا و تکرار پذیری نتایج می گردد.
کنترل کیفی سرنگ سمپلر : ضریب تغییرات یا C V  سمپلرهای اتوآنالایزرها حداکثر تا٪1±قابل قبول می­باشد.
 روش اجرا: کنترل دقت و صحت سمپلر نمونه وکیت در فواصل مرتب هر سه ماه  بک بار ضروری است که به دو صورت ذیل انجام می­شود: 1ـ وزنی (با استفاده از یک سمپلر دقیق) 2ـ رنگ سنجی (با استفاده از یک کنترل معتبر)
امروزه با استفاده از نرم افزارهای قوی بکاررفته در اتوآنالایزرهای بیوشیمی می توان سرعت مکش و تخلیه را بصورت اتوماتیک تنظیم نمود.
2ـ کنترل کیفی Carry Over در سیستم های فلوسلی :
Carry Over یعنی اثر یک نمونه یا انتقال یک نمونه به روی نمونه بعدی
در عمل از آنجایی که قرائت نمونه­ها در یک مسیر و بصورت متوالی انجام می گیرد ممکن است موجب بروز تداخلاتی در نمونه­های پشت سرهم گردد ، که به این پدیده Carry Over گفته
می­شود.
روش اجرا: راههای متعددی وجود دارد ولی ساده­ترین راه این است که کاپهایی سرم کنترل با غلظت بالا (High ) را به صورت یک درمیان با آب مقطر قرار داده و سپس تست اجرا شود، هرگونه افزایش جواب برای کاپهای آب مقطر به دلیل Carry Over بوده و درصد آنرا میتوان حساب نمود.
راه دیگر استفاده از سه نمونه متوالی واجرای تست می باشد، به عنوان مثال برای تست قند: نمونهٔ اول با غلظت پایین (80) و نمونه دوم با غلظت بالا (400) و نمونه سوم همان نمونه اول می­باشد، پس از قرائت نمونه­ها توسط دستگاه ، نتایج به شرح ذیل بدست آمده و Carry Over مطابق فرمول داده شده محاسبه میگرددS1=80                   s2=400               s3=85                                                              Carry over= { s3-s1}  ×100 > 85-80 = 5 > 5/80= 0.0625 × 100= 6.25                                  
                                                                                   s1
حداکثر Carry Over مجاز 1٪ می­­باشد. Carry Over را باید تا حد امکان پائین نگه داشت که این امر به کمک روشهای نوین نرم افزاری و توسط تکنولوژی سخت افزاری جدید قابل حصول است.
 
● راههای پیشگیری Carry Over
1-  شستشوی خودکار مسیر از شروع تا انتها و داخل فلوسل و پروبها 
2 -  قابلیت افزایش و یا کاهش زمان و میزان شستشوی پروبها و مسیر و فلوسل.
3 - شستشوی فلوسل و مسیر با میزان زیادی از مخلوط سرم و Reagent قبل از خوانش .
4 - استفاده از جنس مرغوب تفلون و تیوب و سرنگ در سیستمهای جدید و استفاده از مواد پوشانده سطح داخلی پروبها در سیستمهای قدیمی (مانند Traf).
5 -  حذف حباب هوا وغبار و عوامل مزاحم مانند مو ، کرک و نظیر آن از سیستم.
 
 3ـ کنترل کیفی کیتهای بیوشیمی (Reagents) :
روش اجرا: کیتها در ظروف پلاستیکی یا شیشه ای در دستگاه نگهداری می شوند که این ظرفها دارای حجمهای متغییر از ml  10 الی ml 100 می­باشند. روشهایی که از یک معرف استفاده می­کنند ترجیح داشته ولی استفاده از متدهایی با 2 یا 3 معرف هم رواج دارد.
نکتهٔ مهم : در هنگام انتقال معرفها به ظروف مربوطه، دقت شود که حباب هوا و کف در روی سطح محلول ایجاد نگردد زیرا سوزن نمونه برداری در ابتدا به جای برداشتن معرف ،کفهای روی آنرا برداشت می نماید و این موضوع موجب اختلال در واکنشهای ، چند تست اولیه می گردد.
معمولاً معرفها در یخچال و حرارت مناسب 2 الی 8 درجه سانتیگراد نگهداری می­شوند و بصورت آماده قبل از انجام تست به دستگاه داده میشوند .
دربرخی دستگاهها قسمت خنک کننده در محل معرفها وجود دارد که دمای آن از 4 الی 10 درجه سانتیگراد توسط تکنولوژی بسیار بالا و دقیقی قابل تنظیم می­باشد Cooling Plate) ).
دوام محلولها تا قبل از مخلوط شدن تا تاریخ مندرج بر روی بسته بندی بوده و چنانچه محلولها مخلوط شوند ( برای متدهایی که نیاز به ترکیب معرف 1 و2 دارند) دوام آنها دردمای یخچال (2 الی 8 درجه ) 30 روز ودر دمای اتاق ( 15 الی 25 درجه ) 5 روز می­باشد. ( لطفا برای اطلاع دقیق تر از پایداری کیت ها به بروشور سازنده کیت مراجعه فرمائید )
توجه: در دستگاههایی که دارای سنسور سطح می باشند سوزن مکش ابتدا سطح محلولها را چک می­کند و در صورت خالی بودن ظرف معرف پیغام Reagent Bottle Empty می­دهد.
 4ـ کنترل کیفی محل قرائت:
محل قرائت در اتوآنالایزرها به دو قسمت تقسیم می­شوند :
1 ـ کووت: که محل واکنش همان محل قرائت است.
2 ـ فلوسل: که فقط محلی برای قرائت است و واکنش در کووت واکنش انجام می­شود و سپس محلول حاصل به فلوسل انتقال داده شده و قرائت در آن انجام می­شود.
·         کنترل کیفی کووت: کووتهای واکنش که در آن قرائت نیز صورت می­گیرد از جنس Acrylic یا P.V.C بوده و تعویض کووتها در فواصل یک ماهه ویا پس از رنگ گرفتن یا مخدوش شدن ضروری است.
·         روش شستشوی کووت:
 1) تخلیه کامل
2) شستشوی کامل بادترجنت رقیق اسیدی یا قلیایی
 3) شستشوی کامل با آب مقطر یا دیونیزه
4) خشک کردن با هوا یا پمپ خلاء
روش اجرا: اگرچه شفافیت نوری (Optical Clearity)کووتها در تمام اتوآنالایزرها به صورت اتوماتیک کنترل می شود ولی کنترل کیفی آنها با آب مقطر و قرائت جذب نوری آن ضروری است و حداکثر جذب نوری مجاز 0.02 می­باشد
 کنترل کیفی فلوسل نیز با آب مقطر انجام می شود و در صورت کدورت شستشوی اتوماتیک 10 الی 20 بار با اتانول ٪20 و سپس 20 بار شستشو با آب مقطر توصیه می­گردد.
 
5ـ کنترل کیفی دقت:Precision
کنترل دقت شامل:
Within    Run   Precision    و 2ـ Between   Run   Precision  می باشد.
روش اجرا: به وسیله یک سرم کنترل معتبر یک تست را ده بار اجرا می­کنیم و میانگین و انحراف معیار SD  و CV% را تعیین می­کنیم. این کار را می توان با ریختن نمونه در 10 کاپ مختلف و یا برداشت 10 بار از یک نمونه اجرا کرد.
CV% قابل قبول برای Within Run کمتر از ٪2.5 و برای Between Run    کمتر از 5٪ قابل قبول می باشد.
6 ـ کنترل کیفی صحت (Accuracy):
که شامل سه مرحله به شرح ذیل می­باشد:
الف) تعیین Bias
روش اجرا: با استفاده از یک سرم کنترل معتبر یک تست را با 5 بار اجرا می کنیم و میانگین جوابهای به دست آمده را تعیین نموده در رابطه زیر قرار می دهیم:
× 100{میانگین جوابهای به دست آمده - عدد مورد نظر }    Bias =
عدد مورد نظر
حداکثر Bias مجاز 2٪±می­باشد.
ب) کنترل خطی بودن Linearity Control  :
روش اجرا: از سرم کنترل معتبر High ، رقتهای 1.2 و 1.8 و ...تهیه می­کنیم و تست مربوطه را روی آنها انجام داده و منحنی کالیبراسیون را رسم می کنیم. حداکثر عدم خطی بودن در غلظت 2٪±می­باشد.
ج)تست بازیابی یا Recovery Test :
روش اجرا: از سرم کنترل معتبر High و Low به نسبت مساوی با استفاده از یک سمپلر دقیق ترکیب کرده و غلظت آن را قرائت می نماییم وبا فرمول زیر%Recovery را تعیین می کنیم: به عنوان مثال X1 سرم Low و 2X سرم High می باشد وانتظار داریم غلظت میانگین آنها 150 قرائت شود ولی در عمل 146 قرائت شده است:
X1= 100, X2=200              X= 100 +200 =150
2                  
Bias = { 150 – 146 }× 100 = 2.6% Recovery test = 100 - bias
توجه: %Recovery مجاز بالاتر از 98٪‌ می باشد.
7ـ کنترل کیفی درجه حرارت:
نکته: تنظیم دقیق و ثبات حرارت محفظه واکنش در یک دستگاه اتو آنالایزر موجب افزایش دقت وصحت و همچنین تکرار پذیری سیستم می گردد. کنترل کیفی درجه حرارت سیستم به دو بخش تقسیم می شود:
الف: کنترل دما Incubator و ب) کنترل دمای Cooling Plate  می باشد.
روش اجرا : کنترل دما به کمک یک ترمومتر دیجیتال دقیق صورت می پذیرد و حداکثر خطای مجاز برای 0.1±Incubator درجه سانتیگراد و در Cooling Plate 1±درجه سانتیگراد می باشد.
توجه شود که ابتدا دمای ترمومتر را به نزدیک حرارت مورد نظر رسانده و سپس از آن استفاده شود. به دلیل اینکه دمای محلولها ممکن است با ورود ترمومتر تغییر کند.(برای اینمنظور می توان ترمومتر رادر یخچال خنک کرد حدود 4 درجه سانتیگراد ویا با استفاده از سشوار آن را گرم نمود حدود 37 درجه سانتیگراد)
8ـ کنترل زمان واکنش:
 روش اجرا: اندازه گیری زمان واکنش به کمک تایمر استاندارد انجام می شود و حداکثر خطای مجاز٪5± میباشد.
9ـ کنترل کیفی سیستم فتومتریک:
دستگاه آناالایزر بیو شیمیایی از نظر مسیر نوری به دو دسته تقسیم بندی می شوند:
Single Beam : در این نوع آنالایزر یک شعاع نوری وجود دارد و همهٔ تستها (بلانک، استاندارد، کنترل و نمونه ها) با آن اندازه گیری می­شوند.
Double Beam: در این نوع آنالایزر شعاع نوری لامپ به دو قسمت تقسیم می­شود که یکی از آنها ازکووت رفرانس و دیگری کووت نمونه عبور نموده و سپس به یک فتودتکتور برخورد می کنند.
کنترل کیفی قسمت فتومتریک دستگاه لازم است هرسال یک مرتبه توسط مهندس مربوطه و به وسیلهٔ ابزار الکترونیکی دقیق انجام گردد.
حد اکثر مقادیر مجاز در جذب نوری 2.5 ـ 0 به شرح ذیل می باشند:
Photometric Accuracy   = ± 1%             Linearity = ±0.5%
Wavelength Accuracy   = ±2nm کمتر از     Stray Light = 2%
میزان نویز فیلترها برای یک واحد جذب نوری (1A) نباید از 0.005± واحد جذب نوری بیشتر باشد.
در پایان برای اطمینان کامل از عملکرد صحیح دستگاه می توان از برنامه های Q.C. که در خود دستگاه وجود دارد استفاده نمود و یا اینکه با استفاده از نرم افزارهای Auto Diagnostic Soft Ware و Auto Calibration قسمتهای معیوب را پیدا و اصلاح کرده و دستگاه را مجدداً کالیبر نمود.
●جهت استفاده بهینه از آنالایزرهای بیوشیمی باید نکات زیر را رعایت نمود:
1ـ کنترل برنامه و پارامترهای دستگاه در فواصل هفتگی یا پس از هر تغییر یا تعویض کیت و یا پس از هر جواب اشتباه یا غیر محتمل
2ـ بازدید ظاهری قطعات و تعویض آنها در فواصل کاری معین
3ـ انجام سرویسهای دوره­ای به صورت مرتب توسط افراد مجاز ودوره دیده در کارخانهٔ سازنده دستگاه
4ـ تعویض لوله ها و تیوبینگهای دستگاه در دوره­های منظم کاری
5ـ نظافت مرتب و زمان­بندی شده دستگاه و شستشوی پروبها ـ فلوسل ـ کووت­ها و ظرف Waste
6ـ روغنکاری قسمتهای هیدرولیک و سرویس مرتب آنها
7ـ استفاده از اپراتور مشخص در هر شیفت کاری
8ـ استفاده از پایدارکننده­های ولتاژ Voltage Stabilizer و حذف تداخلهای مزاحم
9ـ توجه به بروشور نحوه کار دستگاه User Manual
10ـ توجه به رطوبت و حرارت و شرایط محیط کار دستگاه ( رطوبت: %85 - 40 دما 25 - 20 درجه سانتیگراد و دور از نور خورشید ـ گردو غبار و مواد شیمیایی زاید , لرزش و میدانهای مغناطیسی)
11ـ پیش بینی قطعات یدکی مورد لزوم: فیوز ـ لامپ ـ تیوبینگ ـ نیدلها ـ فیلترهای پاک کننده و غیره.


موضوعات مرتبط: روش هاي كنترل كيفي آزمايشگاه باليني

تاريخ : جمعه ۱۳۹۱/۰۲/۱۵ | 2:42 AM | نویسنده : محسن آزاد |

طبق گفته سازمان بهداشت جهانی ،انجام خدمات آزمایشگاهی خوب به منزله انجام خدمات پزشکی با کیفیت خوب می باشد

Good Quality Laboratory Service Mean Good Quality Medicine






سیستم درمان شامل دو بخش است :
1- کلینیک : دارای متغیر کم شامل شرح حال بالینی- معاینات بالینی
2- پاراکلینیک : دارای متغیرهای زیاد شامل

T or Technologist

M or Method

I or Instrument

R or Reagen

برنامه کنترل کیفیت Quality Control و در مفهوم وسیعتر آن، تضمین کیفیت یا اطمینان از کیفیت Quality Assurance، مجموعه فعالیتهایی است که برای اطمینان از کیفیت نتایج و ارتقاء سطح کار آزمایشگاهها انجام می شود .

هدف: ایجاد اعتماد کامل به نتایج آزمایشگاهی در افرادی که در امر درمان بیماران دخیل هستند



مدیریت کیفیت Quality Management::همه فعالیتهایی که توسط مدیریت ارشد برای انتخاب سیاستهای کیفی انجام میشود نظیر برنامه ریزی کنترل کیفی، نحوه انجام کنترل کیفیت ، تضمین کیفیت و همچنین روشهای بهبود در این سیستم است



تضمین کیفیت Quality Assurance :تمام فعالیتهای لازم برای اطمینان از اینکه یک روندآزمایش از کیفیت قابل قبولی برخوردار باشد

این فعالیتها شامل كنتـرل كيفيت آزمایشات و ساير مراحل فعاليت هاي آزمايشگاهي است كه از دريافت نمونه تا ارسال گزارش نتيجه نمونه ها به پزشك مي باشد و طیف وسیعی از روشهایی که برای نیل به اهداف کیفیت را در برداشته بوده و هر خطا در هرمرحله از پذیرش بیمار، نمونه گیری، پردازش نمونه،انجام آزمایش و گزارش جوابها را مورد توجه قرار می دهد و بر سه اصل استوار شده است : 1-تکامل برنامه های جاری -2-ارزیابی و تحت کنترل داشتن-3-ارتقاء مستمر کیفیت

تضمین کیفیت شامل این موارد می باشد :

1. مرحله قبل از آزمایش

2. استاندارد کردن روش آزمایشات

3. -کنترل کیفی داخلی

4. -کنترل کیفی خارجی

5. مرحله بعد از آزمایش

6. سازماندهی



کنترل کیفی Quality Control: کنترل کیفی فرآیندی است که در سایر فرآیندها اعم از فرآیندهای فنی و اداری وارد شده و از خروج جواب غیرصحیح جلوگیری می کند که شامل روشهای بکار رفته جهت ارزیابی ، متد آزمایش و نحوه انجام آزمایشاست و غالبا برای شناسایی منبع خطا؛ تخمین میزان خطا و هشدار به پرسنل نسبت به بروز خطا است

كنترل كيفيت شامل دو نوع فعالیت است :

1. اعمالی كه بر اساس محاسبه آماري براي سرم كنترل ها صـورت گرفته است

2. كنتـرل مواد و معرفها ، استـاندارد ها و خطي بودن واكنش ، كنترل درجه حرارت اتاق ها و يخچال ها و ... مي شود كه بدون محاسبه آماري صورت مي گيرد


موضوعات مرتبط: روش هاي كنترل كيفي آزمايشگاه باليني

ادامه مطلب
تاريخ : پنجشنبه ۱۳۹۱/۰۲/۰۷ | 5:5 PM | نویسنده : محسن آزاد |
  • Quality Assurance | تضمین کیفیت

 تمام فعاليتهاى لازم براى اطمينان از مطابقت روند آزمايش با الزامات كيفيت قابل قبول  ISO/DIS ISO/DIS 3534;1995- PrEN 1991  را می گویند .

  • Quality Control| كيفيت كنترل

تكنيكها و اعمالى كه جهت ارزيابى كيفيت خدمات ارائه شده در آزمايشگاه از آنها بهره گیرى ميشود.             

  • ERROR Of Measurement | خظای اندازه گیری
تفاضل مقدارنتيجه حاصل از اندازه گيري و مقدار واقعي. برای نمونه :
  • ميزان واقعی گلوکز در نمونه : 6 ميلی مول در ليتر
  • lميزان اندازه گيری شده گلوکز: 4 ميلی مول در ليتر  
  • l ACCURACY صحت

توافق وتطابق بين نتیجه حاصله از اندازه گيري وارزش واقعی مورد اندازه گيري.

نکته :  مفهوم كلي صحت از مجموعه  (درستي،واقعي بودن TRUENES ودقت PRECISION ) برداشت ميگردد. بنابراين نبايد بعنوان معادل براي هيچكدام از واژه هاي  فوق به تنهايي بكار رود.

  • l TRUENESS درستي ، واقعي بودن
نزديكى و توافق بين ميانگين نتايج حاصله از  اندازه گيرىهاي مكرر (يك نمونه) با مقدار واقعي مورد اندازه گيري TRUENES معمولا با مقدار عددي BIAS  بيان ميشود .
  • l Precision دقت

نزديكى و توافق بين نتايج مكررحاصله از  اندازه گيرى (يك نمونه) تحت شرايط مشخص

  • Imprecision | عدم دقت

پراکندگی نتایج مستقل حاصله ازتکرار آزمایش (اندازه گیری) برروی یک نمونه تحت شرایط مشخص.عدم دقت، عکس دقت میباشد شاخصه هاي عدم دقت: انحراف معيارSD و ضريب انحراف معيار CV %

  •  Inaccracy | عدم صحت  

اختلاف ،مغايرت بين نتيجه یک  اندازه گیری و ارزش واقعی مورد اندازه گيري .

 نکته : عدم صحت ،هنگاميكه در مورد مجموعه اي ازنتايج بيان شود، دربرگيرنده هر دو مورد خطاهاي اتفاقي و سيستماتيك ميگردد.  اين واژه در ارتباط با عدم قطعيت ميباشد.عدم صحت بر عکس صحت میباشد.

  • Bias | (شاخصه اندازه گيری Truness) تورش

تفاوت بین نتیجه موردانتظار از اندازه گیری و ارزش واقعی کمیت مورد اندازه گيري.  تورش برابر با خطاي سيستماتيك اندازه گيري ميباشد . و بطورمعمول ازمقايسه ميانگين نتايج حاصله از اندازه گيري با مقدار واقعي حاصل ميشود.

  • ماده استاندارد |  STANDARD  MATERIAL
ماده ای با خلوص مشخص که از آن بعنوان مبنای مقايسه و اندازه گيری ، استفاده ميشود. (استاندارد اوليه – ثانويه )
  • ماده کنترل  |   CONTROL MATERIAL
موادی که از آنها بمنظور سنجش قابليت اطمينان (صحت و دقت) روش اندازه گيری، استفاده ميشود ترکيب اين مواد بايد در حد امکان مشابه نمونه آزمايش باشد .از اين مواد دربرنامه های داخلی کنترل کيفيت وارزيابی های خارجی کيفيت استفاده ميگردد.
 
  • ماده مرجع  | REFERENCE  MATERIAL -RM      
ماده ای که ارزشهای تعيين شده آن دارای کفايت مناسب و هموژن بوده و  برای کاليبراسِيون يک وسيله ،ارزيابی يک روش اندازه گيری و يا تعيين ارزشهای يک ماده مورد استفاده قرارميگيرد. ماده رفرانس ميتواند بعنوان کاليبراتور يا ماده کنترلی مورد استفاده قرار گيرد ولی همزمان برای دو منظور در يک سيستم ،نبايد بکار رود. (کالیبراتورها-کنترلهای دقت و صحت از سومین گروه مواد مرجع محسوب میشوند). 
 
  • روش مرجع | Reference Measurement Procedure 
دستورالعملی که از نظر عدم قطعيت متناسب با مورد استفاده ، کاملا مورد مطالعه و تحقيق قرار گرفته باشد. خصوصا درتعيين مشخصات ماده مرجع و يا بررسی درستی Trueness دستورالعمل وروشی ديگر.
  • Primary method of measurement ( Primary measurement procedure)

روش اندازه گيری دارای بالاترين کيفيت با عدم قطعيت کاملا مشخص بر اساس واحد های بين المللی.برخی ازاين روشها عبارتند ازisotope dilution mass spectrometry-coulometry- gravimetry- titrometry             

  • l ANALYTICAL SENSETIVITY حساسیت ازمایش

تغييرات سيگنال به تغييرات غلظت يا فعاليت(باید توجه داشت که این واژه مترادف با” حداقل قابل اندازه گیرى” نمیباشد.

  • محدوده اشکارسازی |Detection Limit

محدوده حداقل سنجش  کمترین مقدار از ماده مورد اندازه گیری که روش تجزیه قادر به کشف یا نشان دادن حضور آن باشد .

  • Mean - Arithmetical mean|  میانگین(میانگین حسابی)

 جمع ارزشهای بدست آمده تقسیم بر تعد اد خوانده ها

  • Median  | میانه

نقطه ای در یک سری اندازه گیری که خوانده های مساوی در دو طرف آن قرار داشته باشد.                                         

  • Carry  Over| انتقال

انتقال نمونه یا معرف از یک ظرف به ظرف دیگر یا از یک اندازه گیری به بعدی .

  • کالیراسیون |  Calibration  

مجموعه اعمالی که ارتباط بین مقادیر یک کمیت وارزشهای منتسب را تعیین میکند.                                  

  • مواد کالیبراسیون(کالیبراتور) Calibration Material
مواد مرجع برای کالیبراسیون
موضوعات مرتبط: روش هاي كنترل كيفي آزمايشگاه باليني

تاريخ : پنجشنبه ۱۳۹۱/۰۲/۰۷ | 1:3 PM | نویسنده : محسن آزاد |